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電泳的相關技術知識
更新時間:2009-10-27   點擊次數(shù):3965次

電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區(qū)帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區(qū)帶圖譜或計算其百分含量的方法。  

電泳技術的基本原理和分類

在電場中,推動帶電質點運動的力(F)等于質點所帶凈電荷量(Q)與電場強度(E)的乘積。FQE質點的前移同樣要受到阻力(F)的影響,對于一個球形質點,服從Stoke定律,即:F6πrην式中r為質點半徑,η為介質粘度,ν為質點移動速度,當質點在電場中作穩(wěn)定運動時:FFQE6πrην

可見,球形質點的遷移率,首先取決于自身狀態(tài),即與所帶電量成正比,與其半徑及介質粘度成反比。除了自身狀態(tài)的因素外,電泳體系中其它因素也影響質點的電泳遷移率。

電泳法可分為自由電泳(無支持體)及區(qū)帶電泳(有支持體)兩大類。前者包括Tise-leas式微量電泳、顯微電泳、等電聚焦電泳、等速電泳及密度梯度電泳。區(qū)帶電泳則包括濾紙電泳(常壓及高壓)、薄層電泳(薄膜及薄板)、凝膠電泳(瓊脂、瓊脂糖、淀粉膠、聚丙烯酰胺凝膠)等。

自由電泳法的發(fā)展并不迅速,因為其電泳儀構造復雜、體積龐大,操作要求嚴格,價格昂貴等。而區(qū)帶電泳可用各種類型的物質作支持體,其應用比較廣泛。本節(jié)僅對常用的幾種區(qū)帶電泳分別加以敘述。
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